XXXXXX
醫院
檢驗科免疫室
分析項目作業指導書
Elecsys E 170/E 411
文件編號：
LAB
－
OP
－
MY020
第
頁，共
頁
版本：
A/0
生效日期：
2008-02-01
1
3
1.
分析原理
采用雙抗體夾心法原理，整個過程
18
分鐘完成。
·
第
1
步：
50
μl標本、生物素化的抗
HBsAg
單克隆抗體和釕（
Ru
）標記的抗
HBsAg
單克隆抗體混勻，形成夾心復合物。
·
第
2
步：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復合物通過生物素與鏈霉親和素間的反應結合到微粒上。
·
第
3
步：反應混和液吸到測量池中，微粒通過磁鐵吸附到電極上，未結合的物質被清洗液洗去，電極加電壓后產生化學發光，
通過光電倍增管進行測定。
Elecsys
自動將標本產生的光電信號與從
HBsAg
定標液得出的
Cutoff
值相比較。
2.
標本要求
血清：按標準常規方法采集。
血漿：肝素鈉、
EDTA-K3
或枸櫞酸鈉抗凝。不要使用肝素鋰抗凝血漿。標本在
2
－
8
度可穩定
5
天，
-20oC
可穩定
3
個月。標本
可凍融
6
次。有沉淀的標本使用前需離心。加熱滅活的標本可使用。標本和質控品禁用疊氮鈉防腐。
標本、定標液和質控品在測定前應預溫到室溫。
3.
試劑、校準品、質控品和其他所需材料
采用羅氏原裝配套試劑。
試劑：
M
：
鏈霉親和素包被的微粒（透明瓶蓋），
1
瓶，
6.5ml
。粒子濃度
0.72mg/ml
，生物素結合能力：
470ng
生物素
/mg
粒子。
含防腐劑。
R1
：生物素化的抗
HBsAg
單克隆抗體（灰蓋），
1
瓶，
10ml
，濃度高于
0.5mg/l
，磷酸緩沖液
0.1mol/l
，
pH7.4
含防腐劑。
R2
：
Ru(bpy)32+
標記的抗
HBsAg
單克隆抗體（黑蓋），
1
瓶，
10ml
。濃度高于
0.8mg/l
，磷酸緩沖液
0.1mol/l
，
pH 8.0
含防腐
劑。
校準品：
Cal 1
陰性定標液（白蓋），
2
瓶，
1.3ml/
瓶人血清
,
含防腐劑
Cal 2
陽性定標液（黑蓋），
2
瓶，
1.3ml/
瓶，
HBsAg
濃度約為
0.5IU/ml,
人血清，含防腐劑
質控品：
Elecsys HBsAg
質控品
1
和
2
（
PreciControl
）貨號
11876309
其他所需材料：
Elecsys HBsAg
確證試驗貨號
11820648
Elecsys
通用稀釋液貨號
11732277
Elecsys1010
或
2010
分析儀
Elecsys
系統緩沖液（
ProCell
）貨號
11662988
Elecsys
測量池清洗液（
CleanCell
）貨號
11662970
Elecsys
添加劑液（
SysWash
）貨號
11930346
Elecsys
系統清洗液（
SysClean
）貨號
11298500
4.
儀器和校準
使用儀器：瑞士羅氏診斷公司生產
Elecsys 2010/E 170/E 411
全自動電化學發光免疫自動分析儀
儀器校準
：每批
HBsAg
試劑盒必須用新鮮試劑和
HBsAg Cal 1,Cal 2
定標一次。另外，以下情況需要再次定標：
Elecsys2010
：
·
一個月（同一批號試劑）
·
7
天（放置儀器上的同一試劑盒）
各種分析儀均適用的情況：根據要求進行標定：如質控結果超出范圍時；根據規定進行多次標定。
乙肝表面抗原
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Elecsys E 170/E 411
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版本：
A/0
生效日期：
2008-02-01
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定標液范圍：
(
電化學發光信號計數
)
陰性（
Cal 1
）
600-1200
；陽性（
Cal 2
）
3000-8000
5.
操作步驟
（以
E 170
為例）
5.1
校準操作步驟：
在編緝各項目的參數時，已經在
Application
—
Calib
菜單中定義好了定標類型和幾點定標。因此在對各項目進行定標時，
只需在定標菜單
Calibration
中進行即可。
3.2
進入
Calibration
—
Status
菜單，
用鼠標選擇需定標的項目，
再根據需要點單點
定標（
BLANK
鍵）或兩點定標（
TWO
POINT
鍵）
、跨距定標（
SPAN
鍵）
、多點定標（
FULL
鍵）
，再選擇其它項目進行相應選擇，最
后點
SAVE
，將定標物放入在
Calibration
—
Calibrator
中定義好的位置，點
Start
，再點
Start
，儀器開始定標。
在
Calibration
—
Status
菜單中看定標結果，點
Calibration Result
鍵看定標結果，點
Reaction Monitor
鍵看每個定標
物的反應曲線。
5.2
樣本檢測程序：
單個樣本輸入，在主菜單下選擇
Workplace- Testslection
，在
Sequence No
欄輸入標本號，然后選擇該標本所需做的單個
項目或組合項目，點
SAVE
鍵，樣本號自動累加。
批量常規標本的輸入，在主菜單下選擇
Workplace- Testslection
，在
Sequence No
欄輸入起始標本號，然后選擇該標本所
需做的單個項目或組合項目，點
REPEAT
，輸入該批標本的最后一個標本號，點
OK
即可。
進樣分析，將標本按在
Workplace
菜單中輸入的標本號順序在樣本架上排好，放入進樣盤內
,
按
START
鍵，輸入該批上機標
本的起始標本號，再點
START
鍵，儀器自動開始推架檢測標本。
6.
質量控制
用
Elecsys HBsAg
質控品
1
和
2
（
PreciControl
）。質控品
1
和質控品
2
至少每
24
小時或每一次定標后測定一次。質控間隔期
應適用于各實驗室的具體要求。檢測值應落在確定的范圍內，如出現質控值落在范圍以外，應采取校正措施。
7.
計算方法
儀器會自動根據
Cal 1
和
Cal 2
的測定值計算
Cut-off
值。每一個標本的結果以有反應性或無反應性以及
Cutoff
指數形式（標
本信號
/ Cutoff
）報告。
8.
參考范圍
在歐洲和澳洲隨機選擇的供血者當中，
ElecsysHBsAg
重復呈現陽性反應的比例低于
0.1%
。用該項試驗檢測
364
例
HBsAg
有反
應性患者，
364
例呈現陽性反應（
100%
）。
9.
分析性能
10.
干擾因素
該方法不受黃疸（膽紅素
<30mg/dl
）、溶血（血紅蛋白
<1.4g/dl
）、脂血（脂質
<2800mg/dl
）和生物素
<40ng/ml
等干擾。
接受高劑量生物素
（
>5mg/
天）
治療的病人，
至少要等最后一次攝入生物素
8
小時后才能采血。
不受類風濕因子干擾
（
2000U/ml
）
。
HBsAg
濃度高達
1.5
百萬
IU/ml
也不出現鉤狀效應。
21
種常用藥物經試驗對本測定無干擾。
根據目前所知，所有
HBsAg
測定方法均不能夠檢測出全部被感染的標本和病人。因此，陰性結果不能絕對排除
HBV
接觸或感
染的可能性。有
HBV
接觸史的人，
HBsAg
陰性可能是因其體內
HBsAg
含量低于檢測下限或抗原對所用抗體無反應性的緣故。
接受過小鼠單抗治療或診斷的病人可能會出現假陽性反應。偶爾會遇到抗鏈酶親和素抗體和抗釕抗體的干擾。
Elecsys HBsAg
測定結果應結合病人病史、臨床其他檢查結果綜合起來進行診斷
11.
結果解釋
標本的
Cutoff
指數
<1.0
判斷為
HBsAg
無反應性，可判定該標本
HBsAg
陰性，不需進一步的試驗。標本的
Cutoff
指數≥
1.0
判
斷為
HBsAg
有反應性。所有呈現有反應性的標本必須重新測定一次，并且每份標本做二次測定。如果二次均為無反應性，標本可
確認為
HBsAg
陰性。如果二次重復測定中有一次為有反應性，則該標本確認為重復有反應性。重復有反應性的標本必須用中和試
驗
(ElecsysHBsAg
證實試驗
)
進行測定。如中和試驗陽性
,
標本判定為
HBsAg
陽性。
12.
臨床意義